较大可能是因为使用的纯水ph值偏酸或偏碱严重，在高温下ph值偏酸或偏碱严重将导致琼脂水解增强，从而使琼脂浓度大大降低而无法凝固。(既然你在加热前调了PH值7.4-7.6那就不是这个原因）其它：灭菌温度过高、灭菌时间过长、琼脂质量较差等原因也可导致灭菌后不凝固。
