这个碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP⼀NBT)哪个厂家的好？

2025-05-17 10:28:37

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回答（1）：

我看选择博凌科为的碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)的多啊
操作方法：
1、按常规操作，将蛋白样品进行 SDS-PAGE电泳，转膜（硝酸纤维素膜和 PVDF 膜均
可使用）。封闭 30~120 min，一抗孵育 1 小时或过夜；漂洗 3~5 次，碱性磷酸酶标记二抗孵育 30~120 min，漂洗 3~5 次。如上述步骤采用磷酸缓冲液，需换用 Tris 缓冲液漂洗 3~5 次以完全去除磷酸成分对于 AP抑制作用。
2、取 1ml AP reaction Buffer 中加 10μl NBT溶液和 10μl BCIP 溶液，混匀。注意：根据膜的大小，AP Buffer、NBT、AP Buffer NBTBCIP 的量等比例扩大。
3、把经洗涤的 PVDF/NC 膜浸入显色底物混合物中，于室温平缓摇动进行温育。
⒋细心观察反应过程，待蛋白膜上条带呈色明显，而无明显背景时(一般约 5-15 分钟)，把膜浸入水中漂洗停止反应。
注意：若信号太弱可增加反应时间。
5、拍摄膜照片或直接保存膜留作永久试验纪录。