原核表达产物纯化后有一条非目的蛋白条带,怎么办

2025-05-20 21:39:02
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回答(1):

  1. 如果有抗体,做个western blot判断下,是杂带还是降解片段;

  2. 如果是杂带,优先考虑优化你使用的纯化方案,如Ni柱,考虑延长washing buffer的时间和提高咪唑浓度,使用分辨率更好的填料;

  3. 还去不掉,考虑用2步或3步纯化,比如用离子交换、凝胶过滤。


个人见解,仅供参考,祝一切愉快! 

回答(2):

一般是你的蛋白降解了?再找找减少降解的方法.