如果有抗体,做个western blot判断下,是杂带还是降解片段;
如果是杂带,优先考虑优化你使用的纯化方案,如Ni柱,考虑延长washing buffer的时间和提高咪唑浓度,使用分辨率更好的填料;
还去不掉,考虑用2步或3步纯化,比如用离子交换、凝胶过滤。
个人见解,仅供参考,祝一切愉快!
一般是你的蛋白降解了?再找找减少降解的方法.