孵育过夜的目的就是为了让蛋白和GST磁珠结合的更充分GST-tag是一个分子量比较大的tag,所以在结合GST填料时会比其它小标签(比如His-tag)要更困难一点。时间短的话可能部分蛋白结合的不够牢,冲洗的时候就把样品蛋白冲洗下来了。增加结合时间可以有效的提高样品蛋白的结合率,所以会选择孵育过夜。